ABSTRACT The aim of this study was genotypically characterize Leptospira sp. clinical isolates from Mexico which were previously identified as Leptospira interrogans serovar Pomona (POM) by phenotypic methods. The Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) method was used for DNA amplification with five oligonucleotides. A dendrogram was constructed using the Unweighted Pair Group Method Analysis (UPGMA). During the genotypic characterization, the studied isolates constituted a group which was associated with the reference strain L. interrogans serovar Pomona. The Minimum Spanning Networks (MST) analysis revealed the same cluster between Mexican isolates and the reference strain POM. Clinical isolates identified as L. interrogans serovar POM have a clonal reproduction type, suggesting that this clone is distributed in different regions of Mexico.

Chagasic cardiomyopathy is a common disease in Latin America, however similar clinical pictures exist that can be confused with this, as they give negative results to the tests that detects T. cruzi, like non Chagasic rural endemic chronic cardiopathy, highly common in Venezuela. Using histopathology techniques, "idiopathic cardiomyopathy" is frequently found as the cause of death when the etiology of this disease is not known. This paper presents the case of a man of 26 years old who died of dilated cardiomyopathy secondary to leptospirosis. Clinically, in addition to the cardiac failure, jaundice, hyperbilirubinemia, transaminases increase, proteinuria and hematuria were present. Initially it was suspected Chagasic cardiomyopathy but the epidemiologic background and the parasitologic and serologic tests for T. cruzi gave negative results. The dark field microscopy videorecording of blood and urine samples, argentic impregnation and immunohistochemistry tests as well as haemoculture in EMJH medium were positive for L. interrogans serovar Pomona. Postmortem we confirmed the presence of leptospira in different tissues through of histopathology, argentic impregnation, indirect immunofluorescence and immunohistochemistry.

La miocardiopatía chagásica es común en Latinoamérica, sin embargo, existen cuadros similares que se pueden confundir con ésta, pero son negativos a las pruebas para detectar T. cruzi, como la cardiopatía crónica endémica rural no chagásica, común en Venezuela. En México y otros países es común encontrar como causa de muerte la "miocardiopatía idiopática" cuando no se encuentra la etiología de la misma. Se presenta el caso de un hombre de 26 años que murió por miocardiopatía dilatada secundaria a leptospirosis. Clínicamente, además de la falla cardiaca destacaban ictericia, hiperbilirrubinemia, elevación de transaminasas, hematuria y proteinuria. Inicialmente se había sospechado miocardiopatía chagásica, pero los antecedentes epidemiológicos y las pruebas parasitológicas y serológicas para T. cruzi fueron negativos. Se le practicó videograbación en microscopía de campo oscuro en sangre y orina, impregnación argéntica, inmunohistoquímica y hemocultivo en medio EMJH, positivos todos a leptospirosis. El cultivo fue positivo a L. interrogans serovariedad Pomona. Postmortem se confirmó la detección de leptospira en tejidos mediante histopatología, impregnación argéntica, inmunofluorescencia indirecta e inmunohistoquímica.

Se valoró que a pesar de ser la serología y particularmente la técnica de aglutinación microscópica, los métodos más recomendados para realizar el diagnóstico de leptospirosis, con frecuencia fracasa en el diagnóstico de casos individuales y brotes, en los cuales este termina realizándose postmortem, mediante impregnación argéntica e inmunohistoquímica, además de ser incapaz de diagnosticar leptospirosis crónica, porque en esta, los títulos de anticuerpos son muy bajos (≤1:80). Por ello y por la necesidad de un diagnóstico de laboratorio veraz y oportuno, se realizó un estudio comparativo de la videograbación en campo oscuro, apuntalada por la impregnación argéntica y la inmunohistoquímica en sangre y orina, contra la serología por la técnica de aglutinación microscópica, en 60 pacientes con leptospirosis crónica. La videograbación en campo oscuro, la impregnación argéntica y la inmunohistoquímica resultaron mucho más sensibles que la técnica de aglutinación microscópica, además de ser comparables entre sí, por lo que la videograbación es recomendable para realizar un diagnóstico rápido, temprano y económico, en particular si se asocia a la inmunohistoquímica o la impregnación argéntica. Asimismo, al cultivar estas muestras se obtuvieron 2 cepas de 82 % de primocultivos positivos, y se obtuvo una microfotografía electrónica en la sangre periférica de uno de los casos estudiados, lo que asegura el estudio y avala la existencia de la leptospirosis crónica.

Two cases of chronic leptospirosis in bicitopenic and pancitopenic patients. respectively, with mucocutaneous and visceral bleedings were presented. They were diagnosed myeloblastic leukemia M3 and acute lymphoblastic leukemia L2 by bone marrow aspiration and they were treated as such at the hematology department of a general hospital. Both patients died after one of them had considerably improved on being treated with sodium crystalline penicillin at high doses. The histopathological studies could not demonstrate the presence of neoplastic cells in bone marrow but leptospiras were found by means of silver stained preparations (Warthin - Starry) and immunofluorescence, both in this organ and in other tissues studied: kidney., spleen, liver and lungs. The histopathological diagnoses were generalized leptospirosis with medullary aplasia and generalized leptospirosis with myelodisplastic syndrome, respectively. It was reviewed the possibility that leptospira could cause leukemoid syndromes and/or leukemia. Based on these results, it is recommended to hematologists, infectologists, pathologists, and others, to use again the technques of argentic impregnation, immunohystochemistry and immunofluorescence to study the bone marrow and other tissues in order to detect the possible presence of leptospira that would allow to treat the patients more effectively, particularly, patients like these that had serological titres considered negatives so as to avoid the false security existing in the official health institutions about the minimum or null impact that leptospirosis cause in public health, which imply the absence of control systems for this spirochetosis.

Se presentaron 2 casos de leptospirosis crónica, en pacientes bicitopénico y pancitopénico respectivamente, con sangrados mucocutáneos y viscerales, diagnosticados de leucemia mieloblástica M3 y leucemia linfoblástica aguda L2, mediante aspirados de médula ósea y tratados como tales por el servicio de Hematología de un Hospital General. Ambos pacientes fallecieron, después de que uno de ellos había mostrado mejoría importante al ser tratado con penicilina sódica cristalina a dosis altas. Los estudios histopatológicos no pudieron demostrar la presencia de células neoplásicas en médula ósea y sí de leptospiras, mediante preparaciones teñidas con plata (Warthin-Starry) e inmunofluorescencia, tanto en este órgano, como en otros tejidos estudiados: riñones, bazo, hígado y pulmones. Los diagnósticos histopatológicos fueron los de leptospirosis generalizada con aplasia medular y leptospirosis generalizada con síndrome mielodisplásico, respectivamente. Se revisó la posibilidad de que Leptospira pueda causar síndromes leucemoides y/o leucemia y basados en los resultados se recomienda a hematólogos, infectólogos, patólogos, y otros, a volver a utilizar las técnicas de impregnación argéntica, inmunohistoquímica e inmunofluorescencia, al estudiar médula ósea y otros tejidos, para detectar la posible presencia de leptospiras y así tratar de forma eficaz al paciente; particularmente en pacientes que como estos tuvieron títulos serológicos considerados como negativos, para evitar la falsa seguridad en las instituciones sanitarias oficiales acerca del mínimo o nulo impacto de la leptospirosis en la salud pública, lo que implica la ausencia de sistemas de control para esta espiroquetosis.

400 patients were studied by microscopic videorecording in dark field and MAT. The videorecording in blood was positive in 93 % and, in urine, in 95 %. Of the total of cases, 96 % presented antibody titers. The wide symptomatic range gave origin to more than 50 different diagnoses in the studied patients, who were confirmed that they suffered from chronic leptospirosis by the diverse tests made.

Se estudiaron 400 pacientes mediante videograbación microscópica en campo oscuro y MAT. La videograbación en sangre fue positiva en 93 % y en orina en 95 %. Del total de los casos, 96 % presentó títulos de anticuerpos. La amplia gama sintomática dio origen a más de 50 diagnósticos diferentes en los pacientes estudiados, a los que se les comprobó por las diferentes pruebas realizadas que padecían leptospirosis crónica.

26 patients with active posterior uveitis were studied by methodologies for the confirmation of leptospirosis. ELISA-IgG was positive in 10 patients and MAT in 21. Leptospiras were observed in blood and urine. The results suggest that posterior uveitis may be caused by pathogenic leptospiras.

Se estudiaron 26 pacientes de uveitis posterior activa mediante metodologías para la confirmación de leptospirosis. ELISA-IgG fue positivo en 10 pacientes y MAT en 21. Se observaron leptospiras en sangre y orina. Los resultados sugieren que la uveitis posterior puede ser causada por leptospiras patógenas.

Data from the late eighties indicate that 1.6% of the Mexican population was infected with Chagas' disease and that transmission by way of blood transfusion was taking place in nearly every state, in areas of different sizes. The risk of transmission via that route has seldom been documented in Mexico, and for this reason a sentinel survey was conducted in 1994 in 18 blood banks belonging to the Ministry of Health and located in various states. The purpose of the study was to determine the risk of transmission via blood transfusion and to calculate the national prevalence of infection among potential donors, so as to have a set of general indicators of the prevailing disease burden and of the importance of this transmission route. Participants were selected on the basis of operating criteria: all government-run transfusion centers with the capacity to screen blood donors for at least one year and persons seeking to donate blood (n = 64969) who satisfied the Official Mexican Standards (Norma Oficial Mexicana) for the therapeutic use of human blood and blood products. For the analysis of the results the centers were grouped according to migration flow in order to detect any possible influence the latter may have had on Chagas' disease transmission within the country. Screening was done with indirect hemagglutination using a reagent produced by the Instituto Nacional de Diagnóstico y Referencia Epidemiológicos and donated to the blood banks. Positive cases were confirmed by indirect immunofluorescence. Positive results were detected in 996 persons, for a prevalence of 1.5% (95%CI: 1.44 to 1.63). Concordance between the final results obtained by local labs and by the central lab was given by a kappa index of 0.87 (95%CI: 0,862 to 0.877). Cities having the highest emigration rates had three times the risk of transmission as compared to cities that drew immigrants (odds ratio = 2.82; 95%CI: 2.18 to 3.65). We recommend that mandatory serologic screening be enforced throughout Mexico, since migration makes it difficult to determine which areas are endemic.

Datos de finales de los años ochenta indican que 1,6% de la población mexicana estaba infectada por la enfermedad de Chagas y que la transmisión de Trypanosoma cruzi por transfusión de sangre ocurría en casi todos los estados, si bien en zonas de diversa extensión. El riesgo de transmisión por esa vía está poco documentado en México, por lo que en 1994 se realizó una encuesta centinela de 18 bancos de sangre de la Secretaría de Salud, situados en sendos estados. El estudio tuvo como objeto conocer el riesgo de transmisión por transfusión de sangre y estimar la prevalencia nacional de infección en los candidatos a donantes, para disponer de indicadores generales de la situación actual de la enfermedad y de la relevancia de ese tipo de transmisión. La selección de participantes se basó en criterios operativos: todos los centros estatales de transfusión que contaban con la capacidad para tamizar a los donantes de sangre por lo menos durante un año y los candidatos a donar (n = 64969) que cumplían con los requisitos exigidos por la Norma Oficial Mexicana para la disposición de sangre humana y derivados con fines terapéuticos. Para el análisis de los resultados, los centros se agruparon según el flujo migratorio para detectar cualquier posible relación entre este y la transmisión de la enfermedad de Chagas en el país. Como prueba de tamizaje se usó la hemaglutinación indirecta con reactivo producido por el Instituto Nacional de Diagnóstico y Referencia Epidemiológicos y donado a los bancos de sangre. Los casos positivos se confirmaron mediante la inmunofluorescencia indirecta. Se detectaron 996 personas con resultados positivos, que representan una prevalencia de 1,5% (IC95%: 1,44 a 1,63). La concordancia de los resultados finales entre los laboratorios locales y el laboratorio central presentó un índice kappa de 0,87 (IC95%: 0,862 a 0,877). En las ciudades con los índices más altos de emigración el riesgo de transmisión fue tres veces mayor que en las ciudades receptoras de inmigrantes (razón de posibilidades = 2,82; IC95%: 2,18 a 3,65). Se recomienda ampliar el tamizaje serológico obligatorio en todo México, ya que debido al fenómeno de las migraciones, la definición de área endémica es inestable.